糖水偏愛實(shí)驗(yàn)(sucrose preference test，SPT)是評(píng)價(jià)快感缺失的經(jīng)典行為學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，其原理是利用嚙齒類動(dòng)物對(duì)甜味的偏好而設(shè)計(jì)的一種檢測(cè)方法，動(dòng)物禁食一段時(shí)間后，同時(shí)給予白水和低濃度蔗糖水，以動(dòng)物對(duì)蔗糖水的偏嗜度(糖水偏愛指數(shù))為指標(biāo)檢測(cè)去判斷動(dòng)物是否出現(xiàn)快感缺失這一抑郁癥狀。1981年，Katz等首次在抑郁大鼠造模過程中發(fā)現(xiàn)，應(yīng)激后的大鼠蔗糖和糖精水的消耗減少達(dá)50%，并進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)三環(huán)類抗抑郁藥丙咪嗪可顯著增加模型組大鼠糖水的消耗量。目前該實(shí)驗(yàn)多用于檢測(cè)慢性不可預(yù)知應(yīng)激后的快感缺失行為。

?實(shí)驗(yàn)設(shè)備?

賽昂斯SA226型糖水偏好實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，采用微量注射泵自動(dòng)補(bǔ)水技術(shù)，可以準(zhǔn)確測(cè)量大小鼠飲水量、飲食時(shí)間、飲水次數(shù)。每個(gè)水嘴前有位置傳感器，只有當(dāng)大小鼠進(jìn)入飲水區(qū)域，缺少的水才是大小鼠真正喝掉的；大小鼠不在飲水區(qū)域，因自然揮發(fā)掉的水或者震動(dòng)滴下的水都被軟件自動(dòng)去除。

「產(chǎn)品特點(diǎn)」

1、軟件支持“一鍵換瓶”功能；

2、飲水檢測(cè)模塊化設(shè)計(jì)，方便位置交換；

3、采用微量注射泵精準(zhǔn)補(bǔ)水，精度0.01ml；

4、高通量，最大支持200通道同時(shí)試驗(yàn)；

5、支持長(zhǎng)時(shí)間試驗(yàn)，支持試驗(yàn)中途換水；

6、最大程度還原飼養(yǎng)籠環(huán)境，減少應(yīng)激反應(yīng)；

7、軟件自動(dòng)過濾液體揮發(fā)對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)的干擾；

8、飲水事件可通過TTL信號(hào)同步到第三方設(shè)備;

9、飲水時(shí)間精度0.01s,飲水量精度0.001ml；

10、每個(gè)籠盒并聯(lián)到主機(jī)，任一通道故障不影響其他通道正常試驗(yàn)；

11、試驗(yàn)指標(biāo)：?jiǎn)未物嬎?、總飲水量、單次飲水時(shí)間、總飲水時(shí)間、飲水次數(shù)等。

?實(shí)驗(yàn)流程?

• 前期準(zhǔn)備：選擇成年雄性C57BL/6小鼠（8-10周齡），單籠飼養(yǎng)適應(yīng)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境1周。測(cè)試金屬嘴導(dǎo)電性，確保舔水信號(hào)靈敏度（誤觸率<1%）；預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證糖水與普通水瓶舔水次數(shù)基線（健康小鼠糖水偏好率>65%）。

• 適應(yīng)期：動(dòng)物需適應(yīng)實(shí)驗(yàn)環(huán)境及雙水瓶裝置，通常12-24小時(shí)。

• 基線測(cè)試：記錄正常狀態(tài)下糖水偏好指數(shù)（糖水消耗量/總液體消耗量×100%）。

• 干預(yù)處理：如藥品注射、慢性應(yīng)激等，隨后再次測(cè)量偏好指數(shù)。

• 最終測(cè)試：實(shí)驗(yàn)組腹腔注射氟西?。?0 mg/kg），對(duì)照組注射生理鹽水；給藥后禁食4小時(shí)（僅提供飲水）；提供糖水與普通水瓶，連續(xù)記錄24小時(shí)舔水次數(shù)；分析時(shí)段特異性數(shù)據(jù)（如給藥后0-4小時(shí) vs 4-24小時(shí)）。

評(píng)價(jià)指標(biāo)：

糖水偏愛指數(shù)=蔗糖水飲用量/(蔗糖水飲用量+飲用水飲用量)x100%。

?注意事項(xiàng)?

(1)糖水偏愛實(shí)驗(yàn)對(duì)環(huán)境變化非常敏感，是影響實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵因素，檢測(cè)應(yīng)在獨(dú)立房間進(jìn)行，保持環(huán)境安靜，且實(shí)驗(yàn)期間保持溫度濕度適宜。

(2)基線測(cè)試階段，對(duì)于多次訓(xùn)練但基線仍不穩(wěn)定，或飲水量過多或過少的動(dòng)物需剔除。

?討論和小結(jié)?

糖水偏愛實(shí)驗(yàn)可以評(píng)價(jià)抑郁模型動(dòng)物是否出現(xiàn)人類抑郁癥核心癥狀--快感缺失，具有較高的可信度。糖水偏愛實(shí)驗(yàn)用于抑郁行為評(píng)價(jià)的方法小結(jié)如下：

1.飲水量的準(zhǔn)確獲取

關(guān)鍵因素是瓶嘴不自動(dòng)向外滴水，只有動(dòng)物舔舐時(shí)才出水，自然揮發(fā)掉的水或者震動(dòng)滴下的水都要扣除。

2.實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｊ?/span>

糖水偏愛實(shí)驗(yàn)分為蔗糖飲水訓(xùn)練、基線測(cè)定、根據(jù)基線分組、抑郁模型復(fù)制和藥物處理蔗糖飲水測(cè)試幾部分。該實(shí)驗(yàn)在慢性應(yīng)激模型中應(yīng)用最廣泛，一般應(yīng)激4~5周，型動(dòng)物水偏愛指數(shù)出現(xiàn)顯著降低。此外，該實(shí)驗(yàn)為抗抑郁藥物起效速率研究的最主要行為學(xué)檢測(cè)方法，因此在藥物處理階段可進(jìn)行周期性檢測(cè)。

3.判斷指標(biāo)

糖水偏愛指數(shù)為主要的評(píng)價(jià)指標(biāo)，抑郁行為判斷標(biāo)準(zhǔn):糖水偏愛指數(shù)低于0.4或者與對(duì)照組相比有顯著性減低?？瞻讓?duì)照組大鼠的糖水偏愛指數(shù)大于80%，空白對(duì)照組小鼠的糖水偏愛指數(shù)大于70%。